通过体外转录（IVT）获得的mRNA，其反应混合物中包含了目标mRNA产物、T7 RNA聚合酶、无机焦磷酸酶、NTP、模板DNA、盐离子、各类添加剂以及IVT过程中形成的mRNA副产物（如dsRNA和截断RNA片段）等杂质。这些杂质的存在可能会干扰mRNA的功能，例如影响其准确定量、降低翻译效率或者改变免疫原性。因此，必须通过有效的纯化技术将目标mRNA从IVT混合物中分离，确保其纯度和完整性，以保证产品的安全性和有效性。

常见的mRNA纯化方法

目前，mRNA的纯化方法主要包括氯化锂（LiCl）沉淀、硫酸铵沉淀、磁珠纯化、硅胶柱膜纯化和层析纯化等。尽管沉淀、磁珠和硅胶柱等方法操作相对简单快捷，但在工业生产场景中，层析纯化是最主要的选择，因其具有更高的纯化效率。

氯化锂沉淀法

氯化锂沉淀是一种传统的mRNA纯化方法，利用锂离子在特定pH环境下减少RNA分子之间的相互排斥，使RNA更容易聚集并形成沉淀。该沉淀通过离心从溶液中分离，但由于环境要求及未去除的锂盐具有潜在毒性，通常建议在300nt以上的RNA片段上使用。

硫酸铵沉淀法

2024年1月，中科院过程工程研究所的研究团队探索了硫酸铵沉淀mRNA的可行性。结果显示，当硫酸铵浓度达到18M时，mRNA的沉淀率超过95%。在室温条件下进行的硫酸铵沉淀法也可以有效去除多种杂质，适用于工业化生产。

硅胶柱膜纯化法

硅胶柱膜纯化依赖于硅胶膜的硅醇基团与mRNA分子之间的相互作用，使得在离心过程中其他杂质被甩出，从而实现mRNA的有效分离。该方法无毒、环保，适合实验室及早期研究阶段的应用，充分体现了尊龙凯时在生物医学领域的先进性和环境友好性。

磁珠法

磁珠法利用表面修饰的氧化铁磁珠与mRNA结合，在磁场的作用下实现纯化。该方法相比氯化锂沉淀法能够更有效地去除杂质，但在使用时需要注意避免影响到mRNA的完整性。

层析法

层析法是工业级别的主流纯化方法，通常采用Oligo(dT)亲和色谱与其他层析技术结合使用，确保获得高质量的mRNA。随着生物制药需求的增长，层析法的技术改进与应用将是尊龙凯时持续关注的方向。

未来展望

随着对高质量mRNA制剂需求的增加，尊龙凯时将继续致力于mRNA纯化工艺的优化和开发，以提供定制化的生物医药解决方案，助力新药研发和技术革新。通过引入新的纯化试剂盒和高性能酶原料，尊龙凯时希望在更广泛的科研和工业应用中促进mRNA技术的发展。