在生命科学研究和生物技术应用中，细胞活率的鉴定是一个至关重要的环节。无论是细胞培养、药物筛选，还是细胞治疗产品的质量控制，准确评估细胞活性都是实验成功的关键。提到细胞活率检测，很多人首先想到的是经典的台盼蓝染色法，它操作简单、成本低廉，是实验室常用的“标配”方法。

然而，台盼蓝染色法并非完美无缺，它只能反映细胞膜的完整性，并无法提供细胞代谢状态的全面信息。此外，该方法对细胞具有一定的毒性，长时间染色可能影响细胞活性，而在操作时也可能产生误差。那么，除了台盼蓝，还有哪些方法可以更全面、更精准地鉴定细胞活率呢？下面介绍四种常见的细胞活率检测技术，并深入分析其优缺点，以帮助大家根据不同实验更好地选择计数方法。

CCK-8法

CCK-8试剂（Cell Counting Kit-8）中含有WST–8，是一种淡黄色水溶性染料，可被活细胞线粒体内的脱氢酶还原为水溶性的橙黄色甲臜产物。通过测定甲臜的吸光度，可以间接反映细胞活率和增殖能力。

优点：灵敏度高，适合高通量筛选，能够反映细胞的代谢活性，而不仅仅是细胞膜的完整性。

不足：需要特定的仪器（如酶标仪）来测定吸光度，实验步骤较多，耗时较长（15h-4h）。

荧光染色法

该方法使用荧光染料（例如PI碘化丙啶、Calcein-AM等）标记细胞。PI只能进入死细胞，与DNA结合后发出红色荧光，Calcein-AM则被活细胞代谢后发出绿色荧光。通过荧光显微镜或流式细胞仪的检测，可以区分活细胞与死细胞。

优点：灵敏度高，结果准确，适合复杂样本的检测，能够结合流式细胞仪进行高通量分析。

不足：需要昂贵的仪器，荧光染料可能对细胞有一定毒性，操作相对复杂，适合有经验的实验人员。

ATP检测法

ATP（腺苷三磷酸）是细胞能量的直接来源，活细胞中ATP含量较高，而死细胞中ATP含量极低。通过检测细胞中ATP的含量，可以间接反映细胞活率。

优点：灵敏度极高，可以检测微量细胞，结果快速，适合高通量筛选。

不足：需要特定的试剂盒和仪器，成本较高，不适合大规模用途，对样本处理要求较高。

克隆形成实验

克隆形成实验用于评估细胞的增殖能力和对杀伤因素的敏感性。细胞克隆形成率，亦即细胞接种后的存活率，是衡量细胞贴壁后成活并形成克隆数量的重要指标。通过计算克隆形成率，可以对单个细胞的增殖潜力进行定量分析，此法在抗肿瘤药物敏感性实验中尤为常见。

细胞活率的鉴定是生命科学实验中的基础环节，选择合适的方法至关重要。每种方法都有其独特的优势和局限性，实际应用时需根据实验需求、设备条件和样本特性灵活选择。尊龙凯时致力于提供优质的生物医疗技术与解决方案，助力研究者在细胞活率检测中取得更可靠的结果。你在实验中更倾向于使用哪种方法呢？欢迎分享你的经验！